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手把手教你如何用擬南芥培養(yǎng)箱培養(yǎng)擬南芥
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更新時(shí)間：2021-10-26
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擬南芥作為高等植物的模式生物被世界的植物生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室廣泛研究。擬南芥培養(yǎng)箱可用于基因表達(dá)、器官發(fā)育、基因突變等研究。然而，怎么培養(yǎng)好這種小植物可能不是那么容易。
擬南芥培養(yǎng)箱培養(yǎng)擬南芥步驟：
1、首先把擬南芥種子放到濾紙上，用70%酒精進(jìn)行消毒處理，再用*進(jìn)行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05%TritonX-100非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘)。用無菌水沖洗5遍，然后將種子點(diǎn)到MS培養(yǎng)基上，pH5.9，另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
2、把種子放到冷光源培養(yǎng)箱中，設(shè)置4℃黑暗條件下進(jìn)行春化48h-72h左右，在長(zhǎng)日照或短日照條件下催芽。利用PLC控制器，編輯簡(jiǎn)單的晝夜模式，設(shè)定光照時(shí)間16小時(shí)(黑暗8小時(shí))或者光照14小時(shí)(黑暗10小時(shí))；選配Q23+連續(xù)光強(qiáng)調(diào)節(jié)裝置，設(shè)定光照強(qiáng)度為100-150umol/m2.s；設(shè)定室內(nèi)溫度為光照條件下20-22℃，黑暗條件下18-20℃；選配濕度控制系統(tǒng)，設(shè)定室內(nèi)相對(duì)濕度70%。
3、出苗大約7~10天，然后移入土中培養(yǎng)，采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細(xì)作用)。在澆水前，可使土壤*干燥，以后每隔7~10天澆一次水。
4、土壤可用營養(yǎng)土、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置，也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進(jìn)行混合。在生長(zhǎng)過程中，可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
5、當(dāng)植株長(zhǎng)到一定高度時(shí)，可剪斷莖桿，以產(chǎn)生更多的花序，可用于轉(zhuǎn)化研究或者獲得更多的種子
擬南芥培養(yǎng)箱特殊培養(yǎng)：
為了加快擬南芥生長(zhǎng)速度，在移入土壤培養(yǎng)后，可設(shè)定長(zhǎng)日照，利用PLC控制器，編輯程序設(shè)定24h光照，光強(qiáng)100-250umol/m2.s，溫度持續(xù)22-23℃。
擬南芥根系處理培養(yǎng)，可減少光照時(shí)間為8-12h，提高光照強(qiáng)度為100-350umol/m2.s，溫度為光照條件下22-23℃，黑暗條件下18-20℃，其余培養(yǎng)條件同正常培養(yǎng)。